Piko Orange蛋白定量試劑盒

產(chǎn)品描述

PikoOrange Protein Quantitation Kit是一個高度敏感的基于熒光技術(shù)定量純化蛋白質(zhì)的試劑盒，其檢測蛋白濃度范圍為0.1~10 μg/mL。比起傳統(tǒng)定量方法如BCA、Bradford或Lowry蛋白定量分析，PikoOrange蛋白定量試劑盒敏感性更佳，此外，與NanoOrange蛋白質(zhì)定量測定技術(shù)相比具有更加優(yōu)秀的線性和重現(xiàn)性。PikoOrange蛋白定量試劑盒可顯示不同蛋白質(zhì)之間的最小變異性，且熒光信號穩(wěn)定長達(dá)16 h；其受測樣本不論為純化蛋白或抗體皆適用。需特別注意的是，PikoOrange對鹽類、緩沖液、去垢劑或是其他化學(xué)物質(zhì)都有不同程度的耐受性（表1）。

產(chǎn)品信息

產(chǎn)品組分

運(yùn)輸與保存

常溫運(yùn)輸。組分A于常溫保存；組分B于常溫避光保存；組分C于4℃保存。有效期36個月。【注】：如果緩沖液出現(xiàn)沉淀，可加熱到37℃并漩渦溶解。

使用方法

1. 制備1X PikoOrange緩沖液：將PikoOrange buffer, 10X (contains 2mM sodium azide) 按1:10 用dH₂O稀釋。例如，添加1 mL 10X 緩沖液至9 mL dH₂O。PikoOrange緩沖液可以儲存在室溫下。

2. 制備1X PikoOrange工作液：將PikoOrange dye, 200X in DMSO 按1:200用1X PikoOrange緩沖液稀釋。例如，添加25 μL 200X PikoOrange染料至5 mL 1X PikoOrange緩沖液。【注】：您將需要大約3 mL工作液制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（見表2)以及每孔檢測樣品250 μL工作液。

3. 準(zhǔn)備未知樣本：10 μL 樣本添加 250 μL 1X PikoOrange工作液。【注】：您可能需要稀釋未知樣本以得到不同濃度的樣本。樣品稀釋可能會減少干擾物質(zhì)的影響。

4. 準(zhǔn)備一個蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)曲線所需的BSA濃度，如表2所示。

5. 樣本和標(biāo)準(zhǔn)蛋白加熱至90~ 95℃ 10 min，此過程需避光操作。

6. 取出樣本室溫避光放置20 min冷卻。短時間離心收集全部樣本。

7. 每個標(biāo)準(zhǔn)樣品或未知樣品取200 μL轉(zhuǎn)移到96孔酶標(biāo)板，熒光酶標(biāo)儀讀數(shù)。激發(fā)/發(fā)射波長為480/598 nm。注：樣品可以被轉(zhuǎn)移到熒光試管使用熒光儀測量。如果需要超過200 μL體積測量，等比例放大配置方案。

表1：PikoOrange對不同化學(xué)物質(zhì)的耐受性

表2：準(zhǔn)備BSA樣品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖1：PikoOrange比NanoOrange有更好的線性和重現(xiàn)性

注意事項

1.     本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實驗研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。